久久久久欧美精品日韩精品,中文字幕亚洲综合小综合,久久精品国产欧美高清,韩日三级成年人的电影

網(wǎng)站首頁技術(shù)中心 > RD 人橫紋肌肉瘤細胞傳代/復(fù)蘇技巧
產(chǎn)品目錄
RD 人橫紋肌肉瘤細胞傳代/復(fù)蘇技巧
更新時間:2024-04-03 點擊量:359

RD 人橫紋肌肉瘤細胞

Human Rhabdomyosarcoma Cells ,RD

貨號:YJ-h180(STR鑒定)

價格: 1350.0

規(guī)格: 1*106

細胞介紹

該細胞可能是TE671的母系??僧a(chǎn)生肌紅蛋白和肌球蛋白ATPase,可用作病毒檢測。

細胞特性

1 來源:肌肉;橫紋肌肉瘤

2 形態(tài):紡錘形細胞和大的多核細胞,貼壁生長少量懸浮

3 含量:>1x10^6  細胞數(shù)

4 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途:僅供科研使用。

運輸和保存

干冰運輸及復(fù)蘇好存活細胞

11mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

2T25瓶復(fù)蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

細胞接收后的處理

1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。

2)請在45X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶12傳代 。            

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1 準備DMEM(推薦YJ-0001)培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。

2 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二.細胞處理:

1 凍存細胞的復(fù)蘇:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2 細胞傳代:如果細胞密度達70%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

該細胞輕微貼壁和懸浮培養(yǎng)的細胞,傳代可以參考以下方法:

1. 收集:將培養(yǎng)瓶中的懸浮的細胞收集到離心管中。用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。由于細胞貼壁不牢PBS潤洗后細胞會脫落所以PBS也要回收到離心管中。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T251-2mLT752-3mL)置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3. 將收集到的懸浮細胞、pbs清洗液中的細胞和消化下來的貼壁細胞以1000rpml離心5min,棄去上清,補加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細胞懸液按12的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

RD 人橫紋肌肉瘤細胞.png


下面T25瓶為例;

1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數(shù)板計數(shù),來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10^6~1×107個活細胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×10^6~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數(shù)、日期等信息。

3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

注意事項

1.收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩(wěn)定細胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài),100*200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據(jù)。

3.由于細胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細胞后一周內(nèi)的細胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。

4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

 

2011年開始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域、生物醫(yī)學(xué)實驗技術(shù)及論文潤色服務(wù),協(xié)助客戶各類實驗服務(wù)及論文潤色十余年,是您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯(lián)系。

實驗技術(shù)服務(wù):


滬公網(wǎng)安備 31011802001677號

亚洲一区精品一区在线观看-日本久久久一区二区三区| 久久夜色精品亚洲噜国产av-大香蕉伊人猫咪在线观看| 美女把腿张开给帅哥桶-无码无套少妇18p在线直播| 亚洲另类熟女国产精品-懂色一区二区三区在线播放| 久久蜜桃精品一区二区-麻豆视频啊啊啊好舒服| 欧美日韩成人在线观看-久久五月婷婷免费视频| 欧美日韩国产综合新一区-国产综合av一区二区三区| 国产午夜精品理论片A级漫画-久久精品国产99亚洲精品| 日韩精品一区二区三区十八-日韩人妻少妇一区二区三区| 欧美视频在线观看国产专区-亚洲91精品在线观看| 在线视频成人一区二区-亚洲另类中文字幕在线| 性都花花世界亚洲综合-日韩av一区二区三区| 国产欧美日本不卡精美视频-日本后入视频在线观看| 国产在线不卡高清一区-日本一区二区三区四区无卡| 久久夜色精品亚洲噜国产av-大香蕉伊人猫咪在线观看| 五月婷婷六月在线观看视频-亚洲黑寡妇黄色一级片| 少妇人妻无码久久久久久-综合图片亚洲网友自拍| 亚洲av综合av一区东京热-黄页免费视频网站在线观看| 国产精品久久久精品一区-99久久免费精品国产男女性高好| 一区二区三区女同性恋-熟妇高潮一区二区高清网络视频| 蜜臀一区二区三区精品在线-99久久久精品免费看国产| 欧美三级韩国三级日本三斤-日本不卡一区不卡二区| 97香蕉久久国产在线观看-麻豆黄色广告免费看片| 亚洲美女喘息呻吟的网站-国产免费一区二区三区三洲| 91精品国产无线乱码在线-999精品视频免费看| 欧美日本亚一级二级三区久久精品-日韩欧美一区二区久久婷婷| 日韩欧美国产综合久久-国产精品一起草在线观看| 国产日韩电影一区二区三区-美女露双奶头无遮挡物| 一区二区国产高清在线-日本高清无卡一区二区三区| 亚洲国产视频不卡一区-激情欧美视频一区二区| 欧美日韩亚洲1区2区-黄污视频在线观看不卡| 色噜噜噜噜一区二区三区-欧美最猛黑人做爰视频| 国产欧美日韩中文字幕在线-国产伊人一区二区三区四区| 一区二区国产高清在线-日本高清无卡一区二区三区| 成人av一区二区蜜桃-亚洲色图激情人妻欧美| 熟女少妇免费一区二区-麻豆一区二区三区免费在线观看| 久久精品亚洲国产av久-国产精品视频一区二区免费| 97香蕉久久国产在线观看-麻豆黄色广告免费看片| 国产aa视频一区二区三区-国产精品久久久久久久毛片动漫| 国产欧美日本一区二区-一区二区三区亚洲在线播放| 人妻少妇无乱码中文字幕-人成免费视频一区二区|