久久久久欧美精品日韩精品,中文字幕亚洲综合小综合,久久精品国产欧美高清,韩日三级成年人的电影

網站首頁技術中心 > IOSE-80 人正常卵巢上皮細胞傳代/復蘇步驟
產品目錄
IOSE-80 人正常卵巢上皮細胞傳代/復蘇步驟
更新時間:2024-03-21 點擊量:335

IOSE-80 人正常卵巢上皮細胞

Human normal ovarian epithelial cells ,IOSE80

貨號:YJ-h112(STR鑒定)

價格: 1350.0

規(guī)格: 1*106 

細胞特性

1 來源:人卵巢

2 形態(tài):上皮細胞樣 貼壁生長

3 含量:>1x10^6  細胞數(shù)

4 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途:僅供科研使用。

運輸和保存

干冰運輸及復蘇好存活細胞

11mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

2T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

細胞接收后的處理

1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。

2)請在45X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據。

3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶12傳代 。    

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1 準備RPMI-1640(推薦YJ-0002)培養(yǎng)基;優(yōu)質胎牛血清,10%;雙抗,1%。

2 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二.細胞處理:

1 凍存細胞的復蘇:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T251-2mL,T752-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。 

3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按12的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

IOSE-80 人正常卵巢上皮細胞.png


下面T25瓶為例;

1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數(shù)板計數(shù),來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10^6~1×107個活細胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×10^6~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數(shù)、日期等信息。

3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

注意事項

1.收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩(wěn)定細胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據。

3.由于細胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。

4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

 

2011年開始我們致力于在生命科學領域生物醫(yī)學實驗技術及論文潤色服務,協(xié)助客戶各類實驗服務及論文潤色十余年,是您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯(lián)系。

實驗技術服務:


滬公網安備 31011802001677號

欧美视频在线观看国产专区-亚洲91精品在线观看| 成人免费黄色在线网站-日韩精品一区二区三区四区在线| 天天干天天天天天天天-亚洲综合av在线三区| 亚洲综合av一区二区三区-高潮又爽又黄无遮挡激情视频| 中文字幕亚洲中文字幕-丰满老妇伦子交尾在线播放| 亚洲日本一区二区三区黄色电形-中文字幕乱码免费熟女| 久久高清超碰av热热久久-国产高清不卡免费视频| 欧美精品一区二区不卡-精品国产一区二区三区香蕉网址| 中文字幕亚洲中文字幕-丰满老妇伦子交尾在线播放| 国产精品熟女视频一区二区-国产日韩精品欧美一区喷水| 99在线观看精品视频免费-国产极品一区二区三区四区| 黄色美女网站大全中文字幕-欧美韩国日本一区二区| 哦啊好大用力欧美视频-麻豆国产传媒片在线观看| 中文字幕日韩精品不卡一区二区-成人av在线观看一区二区| 精品一区二区三区av在线-欧美黑人巨大精品一区二区| 亚洲女人黄色录像一区-日韩av电影在线免费看| 日本韩国亚洲欧美三级-日本东京不卡网一区二区三区| 久久网址一区二区精品视频-日产国产欧美视频一区精品| 国产亚洲欧美一区91-亚洲欧美一区二区在线| 国产精品一区二区在线免费-久久精品国产亚洲av热明星| 欧美成人精品巨臀大屁股-亚洲综合欧美日韩一区| 日韩亚洲欧美综合在线-成人在线网站在线观看| 亚洲国产中文欧美一区二区三区-国产精品一区二区视频成人| 看肥婆女人黄色儿逼视频-秋霞电影一区二区三区四区| 国产美女裸露无遮挡双奶网站-国产精品色午夜视频免费看| 97香蕉久久国产在线观看-麻豆黄色广告免费看片| 亚洲区欧美区在线视频-亚洲碰碰人人AV熟女天堂| 久久人妻一区二区三区欧美-国内不卡的一区二区三区| 人妻少妇无乱码中文字幕-人成免费视频一区二区| 少妇人妻无码久久久久久-综合图片亚洲网友自拍| 欧美字幕一区二区三区-好吊妞欧美一区二区在线观看| 性激烈欧美三级在线播放-久久中文字幕人妻少妇| 夜夜久久国产精品亚州av-欧美大屁股一区二区三区| 国产一区二区三区四区五区麻豆-欧美一级在线视频播放| 熟妇勾子乱一区二区三区-欧美爱爱视频一区二区| 国产美女网站在线观看-国产精品亚洲综合网69| 国产在线观看高清精品-四季av一区二区三区中文字幕| 十九禁止观看无码视频-亚洲国产激情福利专区| 国产成人精品亚洲精品密奴-国产成人AV无码精品| 国产美女网站在线观看-国产精品亚洲综合网69| 日韩高清在线观看一区二区-美产av在线免费观看|