久久久久欧美精品日韩精品,中文字幕亚洲综合小综合,久久精品国产欧美高清,韩日三级成年人的电影

網(wǎng)站首頁技術(shù)中心 > BT-549 人乳腺管癌細(xì)胞傳代/復(fù)蘇步驟
產(chǎn)品目錄
BT-549 人乳腺管癌細(xì)胞傳代/復(fù)蘇步驟
更新時間:2023-12-07 點擊量:538

BT-549 人乳腺管癌細(xì)胞

Human Breast Cancer Cells ,BT549

貨號:YJ-h029(STR鑒定)

價格: 1500.0

規(guī)格: 1*106 

細(xì)胞介紹

來源組織是一個乳頭狀侵入性導(dǎo)管瘤,7個局部淋巴結(jié)中3個已有轉(zhuǎn)移。建立的細(xì)胞是多態(tài)性的,包括上皮細(xì)胞樣組分和多核巨細(xì)胞。向培養(yǎng)基中分泌粘液素樣物質(zhì)。

細(xì)胞特性

1 來源:乳腺,乳腺導(dǎo)管癌

2 形態(tài):上皮細(xì)胞樣,貼壁生長

3 含量:>1x10^6  細(xì)胞數(shù)

4 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途:僅供科研使用。

運輸和保存

干冰運輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

11mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

2T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

細(xì)胞接收后的處理

1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。

2)請在45X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時給剛收到的細(xì)胞拍照(10×20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上,可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。

4備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶12傳代 。

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備

1)準(zhǔn)備1640 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 (推薦:YJ-0002),優(yōu)質(zhì)胎牛血清 10 %,胰島素(推薦:YJ-0016-a) 0.01mg/ml, P/S ,1 % 。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二.細(xì)胞處理:

1 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T251-2mL,T752-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。 

3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按12的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3)細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。

BT-549 人乳腺管癌細(xì)胞.png


下面T25瓶為例;

1. 細(xì)胞凍存時按照細(xì)胞傳代的過程收集消化好的細(xì)胞到離心管中,可使用血球計數(shù)板計數(shù),來決定細(xì)胞的凍存密度。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×10^6~1×107個活細(xì)胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ,按每1ml凍存液含1×10^6~1×107個活細(xì)胞/ml分配到一個凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中,標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。

3. 將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

注意事項

1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。

3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細(xì)胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。

4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

 

2011年開始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域生物醫(yī)學(xué)實驗技術(shù)及論文潤色服務(wù),協(xié)助客戶各類實驗服務(wù)及論文潤色十余年,是您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯(lián)系。

實驗技術(shù)服務(wù):


滬公網(wǎng)安備 31011802001677號

国产一区二区无套内射-国内精品久久久久久久齐pp| 国产一级片久久免费看同-麻豆精品尤物一区二区青青| 国内精产熟女自线一二三区-六月丁香婷婷在线观看| 国产综合日韩激情在线-日韩精品人妻一专区二区三区| 白嫩美女娇喘呻吟高潮-久久一区二区三区日产精品| 国产在线一区二区三区欧美-久久偷拍精品视频久久| 日韩精品亚洲不卡一区二区-成人网在线视频精品一区二区三区| 亚洲国产精品一区二区av-日本一级黄色一区二区| 91麻豆免费在线视频-欧美中文天堂在线观看| 蜜臀一区二区三区精品在线-99久久久精品免费看国产| 久久精品国产96精品-日韩人成理论午夜福利| 黄片免费观看视频下载-国产丝袜诱惑在线视频| 激情字幕久久久字幕中文-一区二区三区免费黄片| 国产欧美一区二区三区嗯嗯-欧美一区二区日本国产激情| 中文字幕人妻少妇第一页-隔壁的女孩在线看中文字幕| 欧美字幕一区二区三区-好吊妞欧美一区二区在线观看| 白嫩美女娇喘呻吟高潮-久久一区二区三区日产精品| 亚洲精品一区网站在线观看-黄页视频免费观看网站| 亚洲一区二区三在线观看-国产精品亚洲а∨天堂123| 日本韩国亚洲欧美三级-日本东京不卡网一区二区三区| 天天干天天干2018-91人妻人人澡人爽精品| 日韩精品中文在线观看一区-亚洲bt欧美bt精品| 99久久精品一区二区成人-麻豆国产av玩弄放荡人妇系列| 欧美日韩国产综合新一区-国产综合av一区二区三区| 欧美一区二区三区调教视频-三上悠亚国产精品一区二区三区| 国产一区二区无套内射-国内精品久久久久久久齐pp| 欧美伦乱淫老妇女激情吧-亚洲女邻居精品二区久久| 亚洲欧美激情自拍色图-国产亚洲精品sese在线播放| 亚洲欧洲成视频免费观看-国产福利一区二区在线观看| 女主播啪啪大秀免费观看-精品99午夜福利影院| 国产老熟女激情小视频-成人一区二区人妻不卡视频| 久久精品国产96精品-日韩人成理论午夜福利| 欧美日韩国产在线资源-超碰成人国产一区二区三区| 黄色美女网站大全中文字幕-欧美韩国日本一区二区| 欧美日韩国产在线资源-超碰成人国产一区二区三区| 人妻丝袜中文字幕在线视频-亚洲成av人片一区二区三区| 三级a级一级大片在线观看-日韩av有码免费观看| 亚洲欧美激情自拍色图-国产亚洲精品sese在线播放| 久久亚州天堂一区二区-色噜噜色哟哟一区二区三区| 久久人妻一区二区三区欧美-国内不卡的一区二区三区| 国产一区二区三区四区五区麻豆-欧美一级在线视频播放|